乳糖是(shi)兒(er)童生長發育的主要(yao)營養(yang)物質之一,對(dui)青少年智力(li)發育十分重要(yao),特(te)別是(shi)新(xin)生嬰(ying)兒(er)*的,在自然界中只有(you)哺乳類動(dong)物的奶中含有乳(ru)糖,各(ge)類植物性食物中是不含乳(ru)糖的。一(yi)分(fen)子乳(ru)糖消化可得一(yi)分(fen)子葡萄糖和(he)一(yi)分(fen)子半(ban)乳(ru)糖。半(ban)乳(ru)糖能(neng)促進腦苷(gan)脂類(lei)和(he)黏多糖類(lei)的生(sheng)成,因而對幼兒智(zhi)力發育非常重(zhong)要(yao)。乳制品企(qi)業通(tong)常(chang)通(tong)過測定(ding)牛(niu)乳中半乳糖的含(han)(han)量來(lai)計算牛(niu)乳中乳糖的含(han)(han)量。
設備:
ELSD3300蒸發(fa)光散射檢測器
Agilent 1260 HPLC,C.01.07
試(shi)劑(ji)及(ji)耗材:
流動相(xiang)A:超純水
流動(dong)相B:色(se)譜純乙腈
色譜柱(zhu):Beksich糖柱,4.6*250mm,5um
(貨(huo)號:Bek445101)
柱溫箱溫度:
30C
樣品(pin):
牛乳(ru)樣品(pin)提取物
樣(yang)品預處(chu)理:
樣(yang)品經蛋白沉淀后,0.45um濾膜過濾(lv)后取上清(qing)液(ye)待上樣
進樣體(ti)積:
20ul
按78%乙腈(jing):22%水等梯度(du)比例進(jin)行檢測,運(yun)行(xing)時間為20min
流動相(xiang)流速(su):
0.9ml/min
樣品檢測:
樣(yang)品(pin)配(pei)置好后置于自動進樣(yang)器中,使用編輯(ji)好(hao)的(de)方法進行自(zi)動進樣分(fen)析
ELSD3300蒸(zheng)發光(guang)散(san)射檢測器測定牛乳中乳糖含量
結(jie)果見表1。
表 1:乳糖定量(liang)檢測,*個(ge)峰為半乳(ru)糖
表2:半乳糖和葡萄糖分離度及拖尾因子情況(kuang)
表 3:半乳(ru)糖定量曲(qu)線
R=0.99903
本次(ci)實驗(yan)的難點是(shi)樣品沒有紫(zi)外吸收,樣品水溶(rong)性強,需(xu)用乙腈稀釋(shi),半(ban)乳糖和葡萄糖(tang)不易達到基(ji)線分離。且ELSD3300運行參數如氣體流速(su)和檢測溫度以及增益值必須(xu)優化(hua)。
本方(fang)法使用ELSD3300測定(ding)了牛乳(ru)(ru)中半乳(ru)(ru)糖的含量,半乳糖和葡萄糖實現(xian)了基線(xian)分離,ELSD3300有平衡(heng)時間短,基(ji)線噪音小,重現性高和線(xian)性好等特點。
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